RNA的提取方法步骤及原理？

一、RNA的提取方法步骤及原理？

RNA提取的一般步骤包括样本处理、裂解、去除DNA和蛋白质、纯化和评估等。

以下是一般提取RNA的步骤：

1.采集样品。RNA可以从各种生物学样品中获得。

2.裂解。样品裂解以释放RNA。裂解剂可以是化学品，物理方法（例如超声波处理，珠研磨器），或酵素。RNA的有效裂解通常是RNA提取的最重要步骤之一。

3.去除DNA和蛋白质。在纯化RNA之前，必须从RNA中去除DNA和多余的蛋白质。去除DNA的步骤包括DNase处理，或用nuclease-free Buffer洗涤。去除蛋白质的步骤包括用酸性Buffer洗涤、钠离子膨胀液(低pH)洗脱或亚硫酸钠脱细胞质净化。

4.纯化RNA。RNA可以通过凝胶过滤，离心或离子交换纯化方法纯化。

5.评估 RNA 。纯化的RNA可以用吸光光度计或电泳进行测量。吸光光度法超过260纳米的RNA的吸收峰，而RNA的260纳米吸收与RNA含量成正比。用电泳分析可以确定RNA的大小、完整性和纯度。

RNA提取的原理：

RNA分子本身比DNA分子更易于降解或附着到其他生物分子或表面。因此，在提取RNA时必须谨慎地处理，以避免RNA的降解或沉淀。RNA提取需要裂解样品细胞或组织细胞，以使RNA完全裸露。裂解的样品要通过不变质和造成RNA的毁坏的最少化。裂解的样品中还可能会存在其他核酸，如DNA，RNA二聚体，RNA三聚体、RNA蛋白复合物。通过添加洗脱剂、上样前预浸的亲疏水性列上进行分离。最后，纯化的RNA需要评估RNA的大小、完整性和纯度。

二、总RNA的提取原理及方法？

RNA抽取一般使用Trizol法抽提: Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。

目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。 Trizol作用原理: 在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。 水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。

三、动物DNA提取的原理和方法是什么？

1、核酸的理化性质

ARNA和核苷酸的纯品都呈白色粉末或结晶，DNA则为白色类似石棉样的纤维状物。除肌苷酸、鸟苷酸具有鲜味外，核酸和核苷酸大都呈酸味。

BDNA、RNA和核苷酸都是极性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离酸易溶于水，

RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L。DNA在水中为10g/L，呈黏性胶体溶液。在酸性溶液中，DNA、RNA易水解，在中性或弱碱性溶液中较稳定。

C.天然状态的DNA是以脱氧核糖核蛋白

(DNP)形式存在于细胞核中。要从细胞中提取DNA时，先把DNP抽提出来，再把P除去，再除去细胞中的糖，RNA及无机离子等，从中分离DNA。

四、植物DNA提取的原理和方法是什么？

原理就是去掉植物细胞壁

细胞膜

质体

线粒体

叶绿体

剩下细胞核了。就是DNA了。

通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并减少研磨过程中各种酶类的作用。

十二烷基肌酸钠(sarkosyl)、十六烷基三甲基溴化铵(hexadyltrimethyl

ammomum

bromide，简称为CTAB)、十二烷基硫酸钠(sodium

dodecyl

sulfate，简称SDS)等离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来。再加入苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物总DNA溶液

五、焊接检测原理及方法是什么？

焊接检测，分为破坏的方法和非破坏方法。破坏的方法有断口、力学、金相、硬度等。非破坏的方法有：MT、UT、RT、PT、ET以及最新的TOFD、相控振、振动声学、表面腐蚀显像、表面硬度、表面应力检测等。每种方法都有不同的原理，都写出来成一大本书了。

MT的原理为缺陷漏磁显示原理、UT为超声波遇缺陷反射原理、RT为射线通过有缺陷的焊件吸收不同成像不同的原理、PT为渗透再显像原理、ET为涡流在焊件中阻碍不同成像不同原理、TOFT是多角度发射和接收超声波原理、相控振是多角度探头同时检测原理、振动声学是敲破盘的原理、表面腐蚀是化学腐蚀的原理，表面硬度是抗压入的原理、表面应力是应力释放的原理。具体也了解哪一种，建议你去买本检测的书。

六、磁珠法提取核酸的原理及步骤是什么？

磁珠法核酸提取原理;

依据与硅胶膜离心柱相同的原理，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的DNA和RNA分离出来，可应用在临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。

磁珠法核酸提取过程

磁珠法核酸提取一般可以分为四步：裂解——结合——洗涤——洗脱。

七、用trizol法提取RNA的方法及每一步的原理？

Trizol就是酚氯仿提取法的常用试剂

Trizol中有酚，异硫氰酸胍和B-巯基乙醇。他们的作用都是使蛋白变性，使蛋白质与核酸解聚。加入氯仿，用来分相，实际上是加速有机相和水相的分层，当溶液pH在酸性的时候，DNA分子就会沉淀在酚与溶液的界面，就是白色层，只有RNA分子留在水相，但溶液pH不在酸性范围内，会使DNA溶解在水相，所以使用时按照说明书要求根据细胞数或培养器皿底面积适量加入Trizol。最后异丙醇沉淀，将水相中RNA提取出来。

八、电吹风的结构及原理是什么啊？

一、电吹风的工作原理：

电吹风的工作原理

吹风机直接靠电动机驱动转子带动风叶旋转。当风叶旋转时，空气从进风口吸入，由此形成的离心气流再由风筒前嘴吹出。空气通过时，若装在风嘴中的发热支架上的发热丝已通电变热，则吹出的是热风；若选择开关不使发热丝通电发热，则吹出的是冷风。吹风机就是以此来实现烘干和整形的目的。

二、电吹风的构造及其作用：

电吹风的构造及其作用

1、壳体。它是保护内部机件的，又是外部装饰件。

2、电动机和风叶。电动机装在壳体内，风叶装在电动机的轴端上。电动机旋转的时候，由进风口吸入空气，由出风口吹出风。

3、电热元件。电吹风的电热元件是用电热丝绕制而成，装在电吹风的出风口处，电动机排出的风在出风口被电热丝加热，变成热风送出。有的吹风机在电热元件附近装上恒温器，温度超过预定温度的时候切断电路，起保护作用。

4、挡风板。有的电吹风在进风口处有圆形挡风板，用来调节进风量。

5、开关。吹风机开关一般用白色表示“停”，红色表示“热风”，蓝色表示“冷风”。

九、微生物DNA提取的原理和方法是什么？

原理：

要进行重组DNA 实验,就离不开外源基因的纯化,而外源基因主要来源之一就要直接从生物的染色体DNA上制备,所以制备高质量的染色体DNA样品经常为基因工程实验所需要,抽提细菌染色体DNA的方法目前已有许多种,这里所介绍的两种方法：一适用于枯杆菌染色体的抽提；另一种方法则适用于大肠杆菌染色体的制备.

基因工程实验所需要的基因组DNA 通常要求分子量尽可能大,以此增加外源基因获得率,但要获得大片段的DNA 非易事,细菌基因组DNA通常是个很大的环状态DNA,而在抽提过程中,不可避免的机械剪切力必将切断DNA,如果要抽提到大的DNA 分子,就要尽可能地温和操作,减少剪切力,减少切断DNA 分子的可能性；分子热运动也会减少所抽提到的DNA分子量,所以提取过程也要尽可能在低温下进行.另外细胞内及抽提器皿中污染的核酸酶也会降解制备过程中的DNA,所以制备过程要抑制其核酸酶的活性.

另外制备的细菌染色体DNA 必须是高纯度的,以满足基因工程中各种酶反应的需要,制备的样品必须没有蛋白污染,没有RNA,各种离子浓度应符合要求,这些在染色体制备时都应考虑到.

大肠杆菌染色体DNA 抽提首先收集对数生长期的细胞,然后用离子型表面活性剂十二烷基磺酸钠（SDS）破裂细胞,SDS 具有的主要功能是：（1）溶解细胞膜上的脂类和蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜；（2）解聚细胞膜上的脂类和蛋白质,有助于消除染色体DNA上的蛋白质；（3）SDS 能与蛋白质结合成为R1—0—SO3R2—蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来.但是SDS 能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它除干净.以免影响下一步RNase的作用.破细胞后RNA经RNase消化除去,蛋白质经苯酚、氯仿:异戊醇抽提除去经洒精沉淀回收DNA.枯草杆菌染色体制备与上类似,但略加修改的方法要适合教学要求.枯草杆菌是格兰氏阳性菌,所以在SDS 处理前需要使用溶菌酶裂解细胞壁.溶菌酶是一种糖苷水解酶,它能水解菌体细胞壁的主要化学成份肽聚糖中的β—1,4 糖苷键,有助于细胞壁破裂,破裂的细胞壁在SDS 的作用下溶菌,同时用蛋白酶K 消化蛋白质,能解离缠绕在染色体DNA上的蛋白质,然后加入一定量的醋酸钾,使蛋白质变性,通常离心除去,在这期间可加入核糖酸酶消化RNA,最后用乙醇回收DNA.

此二种方法抽提的细菌染色体DNA,无RNA和蛋白质污染,可用于限制性内切酶消化,分子再克隆等.但在下一步实验前,要测定其DNA的浓度,常用测定DNA 浓度的方法,是溴化乙锭电泳法；当DNA 样品在琼脂糖凝胶中电泳时,加入的EB 会增强发射的荧光.而荧光的强度正比于DNA 的含量,如将已知浓度的标准样品作电泳对照,就可估计出待样品的浓度。

十、射线测厚仪原理及使用方法是什么？

锂电池正极涂布、锂电池隔离膜涂布、纸张的面密度测量。应用在锂电涂布工序时，该设备可放置于涂布机放卷后、涂布头前，测量待涂布基材的面密度；也可以放在烘箱外、收卷前，测量已烘干的极片面密度。大成精密射线测厚仪利用X射线穿透物质时的吸收、反散射效应实现非接触式测量薄膜类材料的面密度。